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EpiCypher染色質(zhì)研究有望推進(jìn)精準(zhǔn)醫(yī)療

更新時(shí)間:2024-03-19   點(diǎn)擊次數(shù):857次

精準(zhǔn)醫(yī)療,也被稱為個(gè)性化醫(yī)學(xué),是指使用病人特定的分子特征來指導(dǎo)疾病診斷、監(jiān)測病情發(fā)展與治療應(yīng)答、或用于確定藥物開發(fā)新靶點(diǎn)的醫(yī)療模式。


精準(zhǔn)醫(yī)療原則的應(yīng)用使癌癥治療領(lǐng)域取得了長足的進(jìn)步,并有望顯著改變多種病癥的治療,包括代謝和心血管疾病、自身免疫和炎癥性疾病,以及神經(jīng)發(fā)育和神經(jīng)退行性疾病。在這篇文章里,我們將回顧精準(zhǔn)醫(yī)療的基本理念和面臨的挑戰(zhàn),并討論表觀基因組和染色質(zhì)生物標(biāo)志物如何成為推進(jìn)這一重要研究的關(guān)鍵。

 

精準(zhǔn)醫(yī)療的必要性

就歷史觀點(diǎn)而言,大多數(shù)治療方法都是面向廣大患者群體使用的。然而,疾病的病因十分復(fù)雜,通常由遺傳、環(huán)境和生活方式等相互作用引起。因此,治療結(jié)果可能差別很大,患者可能完-全消除或減輕癥狀,也有可能面臨著中度或嚴(yán)重的失敗治療,產(chǎn)生更多副作用或病情進(jìn)展沒有變化,而精準(zhǔn)醫(yī)療是解決這一問題的潛在方案1,2。精準(zhǔn)醫(yī)療的首要目標(biāo)是利用具體病患的分子特征來了解如下多個(gè)方面的信息:

 

● 診斷信息。該病的特征是什么?

● 患者分層。我們能否利用生物標(biāo)志物來完善復(fù)雜疾病的亞型?

● 疾病預(yù)后。該病有多嚴(yán)重?它的病程有多快?

● 治療選擇。對于特定的病患,最佳的治療方案是什么?

● 治療應(yīng)答指標(biāo)。藥物的效果是否符合預(yù)期,還是應(yīng)該改變劑量,嘗試另一種治療方法,或者用另一種藥物作為補(bǔ)充?

● 新藥開發(fā)。我們能否確定新的治療靶點(diǎn)?

 

在尋找這些問題答案的過程中,相當(dāng)一部分的研究經(jīng)費(fèi)被用于確定合適的治療靶點(diǎn)和生物標(biāo)志物。下面,我們將著重介紹當(dāng)前方法、臨床上的成功案例以及精準(zhǔn)醫(yī)療研究的發(fā)展前景。

 

精準(zhǔn)醫(yī)療的基本原則

● 基于遺傳變異的方法 

盡管精準(zhǔn)醫(yī)療的概念早在20世紀(jì)60年代就已經(jīng)存在,但直到21世紀(jì)初人類基因組計(jì)劃完成后,這一運(yùn)動(dòng)才獲得了真正的推動(dòng)力1。這一壯舉使得科學(xué)家們能夠?qū)θ祟愡z傳變異(如突變和單核苷酸多態(tài)性)進(jìn)行大規(guī)模研究,并確定其與獨(dú)-特表型或疾病的關(guān)聯(lián)性3。這些項(xiàng)目被統(tǒng)稱為全基因組關(guān)聯(lián)分析(GWAS),確定了數(shù)十萬種疾病和性狀的風(fēng)險(xiǎn)變異4。


在某些情況下,識別疾病相關(guān)風(fēng)險(xiǎn)變異揭示了潛在的疾病生物學(xué)機(jī)理,這反過來又能夠推動(dòng)醫(yī)療發(fā)展。除此之外,GWAS確定了可選擇的適合患者治療方法的生物標(biāo)志物。下面我們重點(diǎn)介紹幾個(gè)關(guān)鍵應(yīng)用:


案例研究1:克羅恩病和IL-12/IL-23抑制劑

在克羅恩?。–rohn’s disease)中,GWAS發(fā)現(xiàn)細(xì)胞因子IL-12和IL-23與疾病發(fā)展相關(guān)聯(lián)5。針對這些分子促炎作用的基礎(chǔ)研究促進(jìn)了靶向這一途徑的免疫治療藥物實(shí)驗(yàn)的成功6。 


案例研究2:可用于治療選擇的肺癌生物標(biāo)志物

DNA測序已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了多種肺癌相關(guān)的基因變異7,其中7種已被FDA批準(zhǔn)用于治療8。這使得醫(yī)生可以利用基因檢測來選擇治療方法,并希望借此改善患者的預(yù)后。

然而,僅識別疾病相關(guān)的風(fēng)險(xiǎn)變異可能會導(dǎo)致不完備的病因?qū)W觀點(diǎn)。因此,為了充分利用這些發(fā)現(xiàn)推進(jìn)精準(zhǔn)醫(yī)療的發(fā)展,必須了解其功能性結(jié)果。例如,基因組中蛋白質(zhì)編碼區(qū)的變異可能影響蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)、功能和表達(dá)。如囊性纖維化疾病中每一種變異都代表著一種不同的分子結(jié)果,可能需要以不同的方式對待。 


案例研究3:遺傳風(fēng)險(xiǎn)變異為囊性纖維化的治療提供信息

多種遺傳變異與囊性纖維化有關(guān)。根據(jù)致病變異的不同,兩種對CFTR蛋白具有不同作用機(jī)制的藥物(幫助運(yùn)輸?shù)郊?xì)胞表面或離子通道功能)可單獨(dú)或聯(lián)合使用9-11。

值得注意的是,90%以上經(jīng)GWAS確認(rèn)的變異都位于基因組的非編碼區(qū)12,而非編碼區(qū)富含細(xì)胞類型特異的、能夠激活基因表達(dá)的順式調(diào)控元件(即增強(qiáng)子)13。因此,許多研究人員專注于研究疾病風(fēng)險(xiǎn)變體如何影響轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié),而不是蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)或功能14-16。

目前面臨的挑戰(zhàn)在于了解靶標(biāo)基因是什么。非編碼區(qū)可以通過直接和間接的機(jī)制跨越基因組距離發(fā)揮作用;因此,與疾病變異最-接-近的基因不一定是因果決定因素17,18。

 

 基于基因表達(dá)的方法

研究人員發(fā)現(xiàn),在不同的疾病狀態(tài)下,包括癌癥、自身免疫性疾病、神經(jīng)退行性疾病、心血管疾病和其他疾病等,基因表達(dá)都發(fā)生了很大的變化19-23,這突出了通過全基因組調(diào)查方法發(fā)掘疾病的轉(zhuǎn)錄特征的必要性?;虮磉_(dá)研究,包括微陣列和RNA測序方法在內(nèi),已經(jīng)幫助研究者確定了許多疾病的亞型。

 

案例研究4:乳腺癌患者分層和個(gè)性化治療選擇

歸功于基于精準(zhǔn)醫(yī)療的診斷和治療的應(yīng)用,乳腺癌患者的五年生存率已大幅提高24(從1975年的76%提高到現(xiàn)在的90%以上25)。乳腺癌可以通過多種信號受體的表達(dá)進(jìn)行分類,為診斷、選擇合適的治療組合和復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)提供信息。例如,酪氨酸激酶HER2(HER2+)表達(dá)陽性的患者通常使用曲妥珠單抗(trastuzumab),一種靶向HER226的單克隆抗體。將HER2狀態(tài)等分子分類與細(xì)胞分化和增殖的定量測量相結(jié)合,也為患者的預(yù)后提供了信息27。這些只是大量研究結(jié)果中的其中幾個(gè)例子,它們推動(dòng)了該領(lǐng)域的發(fā)展,幫助醫(yī)生治療并給予了乳腺癌患者及其家庭支持。

 

基于基因表達(dá)的個(gè)性化醫(yī)療研究仍在進(jìn)行,既要進(jìn)一步完善有既定生物標(biāo)志物的癌癥亞類,如乳腺癌28,也要完善沒有生物標(biāo)志物的癌癥亞類,如一些腦癌29。這些發(fā)現(xiàn)將產(chǎn)生新的生物標(biāo)志物和治療靶點(diǎn),可能拯救許多生命。

 

當(dāng)前精準(zhǔn)醫(yī)療方法的缺陷

在上文中我們重點(diǎn)介紹了精準(zhǔn)醫(yī)療領(lǐng)域在多方面的臨床成功案例。盡管精準(zhǔn)醫(yī)療已經(jīng)取得了這些顯著的成就,但GWAS和轉(zhuǎn)錄組學(xué)往往無法產(chǎn)生與臨床相關(guān)的生物標(biāo)志物或藥物靶點(diǎn),令許多疾病難以診斷和治療。這可以歸因于許多懸而未決的問題: 

● 哪種變異是疾病的真實(shí)原因?

這些變異很少單獨(dú)發(fā)生。事實(shí)上,變異通常是在被稱為單倍型的大塊DNA中成組遺傳的,這使得我們很難知道哪些變異(如果確實(shí)存在的話)可能會影響疾病狀態(tài)。

● 遺傳和環(huán)境的影響如何交叉作用?

事實(shí)上,一些遺傳變異的外顯率受到生活方式30或環(huán)境因素31的調(diào)節(jié),如服用某些處方藥、運(yùn)動(dòng)和環(huán)境污染,其基因調(diào)控影響和疾病風(fēng)險(xiǎn)與暴露程度相關(guān)。

● 環(huán)境因素是否更可能是主要原因?

一些與疾病相關(guān)的基因調(diào)控變化與遺傳變異完-全無關(guān)。相反,這些基因調(diào)節(jié)變化的根本原因——與從過敏32到低出生體重33到心臟病34等狀態(tài)相關(guān)——取決于環(huán)境暴露。

● 基因表達(dá)是否涵蓋了我們需要知道的一切?

目前研究異常RNA表達(dá)的方法提供了細(xì)胞內(nèi)當(dāng)前情況的快照。它們不能提供有關(guān)細(xì)胞“準(zhǔn)備做什么"的信息,如治療引起的遺傳程序的變化或抗藥性的發(fā)展。這種機(jī)制信息的缺乏留下了許多關(guān)于治療應(yīng)答和復(fù)發(fā)可能性的開放性問題,而這些問題對個(gè)性化護(hù)理具有極大的參考價(jià)值。

● 為什么我們只關(guān)注蛋白質(zhì)編碼區(qū)?

基因表達(dá)和遺傳變異是疾病的主要指標(biāo)——但它們只是影響因素的一部分。事實(shí)上,人類基因組中只有不到1%編碼蛋白質(zhì)35?;蛘{(diào)控主要由非編碼區(qū)控制,非編碼區(qū)可以作為增強(qiáng)子,形成染色質(zhì)環(huán),結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子,或招募表觀遺傳修飾酶和閱讀器蛋白。此外,許多疾病風(fēng)險(xiǎn)變異也富集在非編碼DNA中。因此,非編碼DNA和基于染色質(zhì)的機(jī)制代表了大量未開發(fā)的生物標(biāo)志物和藥物靶點(diǎn)。

 

遺傳、環(huán)境、轉(zhuǎn)錄和染色質(zhì)的融合使得疾病表型發(fā)展十分復(fù)雜(Figure 1)。目前的方法通常無法考慮這些不同的因素,使得人們難以預(yù)測疾病進(jìn)展并對治療作出及時(shí)的反應(yīng)。

EpiCypher-染色質(zhì)研究有望推進(jìn)精準(zhǔn)醫(yī)療 

Figure 1 Environmental and molecular factors together drive disease development.

 

將表觀基因組學(xué)納入精準(zhǔn)醫(yī)療

表觀基因組可能是確定新型生物標(biāo)志物和藥物靶點(diǎn)以推進(jìn)精準(zhǔn)醫(yī)療的關(guān)鍵。表觀基因組包括復(fù)雜的分子代碼,能夠調(diào)節(jié)染色質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能以控制基因表達(dá)。因此,對表觀基因組進(jìn)行的研究可以作為一個(gè)重要的分子工具,幫助我們了解由遺傳變異、環(huán)境和治療導(dǎo)致的基因表達(dá)變化。

為此,染色質(zhì)修飾,包括DNA甲基化和組蛋白翻譯后修飾(PTMs),已經(jīng)為基因調(diào)控程序提供了顯著的見解,并正在成為精準(zhǔn)醫(yī)療研究的重要組成部分。

 

● DNA甲基化

從歷史觀點(diǎn)上說,繪制DNA甲基化圖譜已經(jīng)成為表觀基因組的精準(zhǔn)醫(yī)療研究的首-選方式。這種既定的抑制性染色質(zhì)標(biāo)記有多種檢測選擇:甲基化敏感的PCR和限制性酶、基于抗體的方法(如MeDIP)或亞硫酸氫鹽轉(zhuǎn)化后的測序(BS-seq/WGBS)36,37。DNA甲基化與診斷學(xué)的結(jié)合帶來了令人興奮的進(jìn)展:

 

案例研究5:中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)腫瘤的分類和治療選擇

許多原發(fā)性中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤難以用傳統(tǒng)的組織學(xué)方法進(jìn)行分類38。例如,中樞神經(jīng)系統(tǒng)神經(jīng)外胚層腫瘤是類別廣泛,其組織學(xué)特征是小的、分化不良的神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)。在一項(xiàng)研究中,DNA甲基化分析的整合將75%以上的腫瘤重新分類為更具體的亞型,如髓母細(xì)胞瘤、高級膠質(zhì)瘤、室管膜瘤和松果體瘤39。在其他原發(fā)性中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤中,如膠質(zhì)母細(xì)胞瘤,選擇性啟動(dòng)子(如MGMT)的甲基化促進(jìn)治療的靈敏度,如替莫唑胺(temozolomide),指導(dǎo)治療選擇40。

 

案例研究6:無創(chuàng)體外診斷的發(fā)展

在早期研究中,在患者血漿或血清中的循環(huán)無細(xì)胞核小體上能夠檢測到DNA甲基化,并在一些概念驗(yàn)證的臨床研究中觀察到,如肺癌、乳腺癌和結(jié)直腸癌37,41-43。這為開發(fā)FDA批準(zhǔn)的體外診斷測試鋪平了道路,這些測試來自容易獲得的樣本,如Cologuard®和Epi proColon®的糞便或血液,以及幾種有前景的液體活檢測試,包括GRAIL的Galleri™,以檢測癌癥,無論其類型如何44-46。

 

然而,由于無法提供不同染色質(zhì)區(qū)間的細(xì)節(jié),特別是組織/細(xì)胞特異性增強(qiáng)子的活性,DNA甲基化的研究對某些應(yīng)用來說是不夠的。此外,DNA甲基化并不總是一種抑制性標(biāo)記47,這意味著它對基因表達(dá)的影響可能是模糊的。雖然DNA甲基化已經(jīng)證明破譯表觀基因組可以為精準(zhǔn)醫(yī)療方法提供信息,但就揭示表觀基因組學(xué)和染色質(zhì)上的基因表達(dá)修飾機(jī)制而言,這只是冰山一角。

 

組蛋白翻譯后修飾 

染色質(zhì)上顯著的化學(xué)和蛋白質(zhì)多樣性充滿了潛在的精準(zhǔn)醫(yī)療靶點(diǎn)。具體而言,組蛋白PTMs和染色質(zhì)結(jié)合蛋白(如轉(zhuǎn)錄因子)對基因表達(dá)產(chǎn)生了強(qiáng)大而動(dòng)態(tài)的影響。迄今為止,超過100種獨(dú)-特的組蛋白PTMs或其組合被認(rèn)為與人類疾病有關(guān),包括多種癌癥48-53,與此同時(shí)人們也發(fā)現(xiàn)組蛋白PTM模式的整體改變可以預(yù)測疾病狀態(tài)、復(fù)發(fā)情況和患者的治療應(yīng)答54-56。


與DNA甲基化甚至染色質(zhì)可及性檢測(如ATAC-seq)不同,組蛋白PTMs提供了對不同、特定基因組特征的認(rèn)知。全基因組染色質(zhì)圖譜工具的開發(fā)有助于將組蛋白PTMs分配到特定的基因組區(qū)間(Figure 2),如活躍的增強(qiáng)子(H3K27ac)、活躍的啟動(dòng)子(H3K4me3)、活躍的基因體(H3K36me3),甚至被抑制的基因(H3K9me2/3,H3K27me3)。因此,研究組蛋白PTMs可以闡明基因調(diào)控格局的多樣性,包括細(xì)胞的功能。一個(gè)典型的例子是二價(jià)H3K4me3/H3K27me3標(biāo)記,它表示未分化的干細(xì)胞或原生細(xì)胞中 '準(zhǔn)備好'激活的增強(qiáng)子和啟動(dòng)子57。值得注意的是,在癌癥中經(jīng)常觀察到二價(jià)基因表達(dá)的改變58,它們可能與病情惡化59或耐藥性60有關(guān)。

EpiCypher-染色質(zhì)研究有望推進(jìn)精準(zhǔn)醫(yī)療 

Figure 2 Overview of the localization of chromatin features. 

因此,基因組圖譜研究包含了個(gè)性化醫(yī)療的關(guān)鍵信息。這一領(lǐng)域的前沿研究已經(jīng)在精準(zhǔn)醫(yī)療領(lǐng)域產(chǎn)生了影響:

 

案例研究7:癌癥治療反應(yīng)的預(yù)測和調(diào)節(jié)

一項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn),組蛋白PTM H3K27ac是增強(qiáng)子和活躍轉(zhuǎn)錄程序的標(biāo)志物,可用于區(qū)分結(jié)直腸癌的亞類型,包括預(yù)后結(jié)果和治療應(yīng)答61。此外,使用這些增強(qiáng)子亞型分類的新型組合療法在患者衍生的異種移植中顯示出療效。另一項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn),抑制性組蛋白PTM H3K27me3使乳腺癌細(xì)胞對化療敏感,而阻止這一標(biāo)記會抑制藥物耐受性并延緩腫瘤形成60,這表明組蛋白PTMs具有治療潛力。

 

這些研究共同表明,表觀基因組研究具有指導(dǎo)臨床決策和藥物開發(fā)的強(qiáng)大潛力。

  

與整合表觀基因組學(xué)有關(guān)的挑戰(zhàn)

雖然染色質(zhì)圖譜展示了精準(zhǔn)醫(yī)療應(yīng)用的巨大前景,但表觀基因組在臨床應(yīng)用方面的研究一直極-具挑戰(zhàn)性。

 

歷-史-上,染色質(zhì)圖譜是通過ChIP-seq進(jìn)行的。雖然具有突破性,但也有很大的局限性,這種局限阻礙了它在精準(zhǔn)醫(yī)療中的應(yīng)用。具體來說,這些限制包括:

 

● 低靈敏度和低通量,需要數(shù)以百萬計(jì)的細(xì)胞,深度測序,以及大量的實(shí)踐時(shí)間。

● 難以適應(yīng)不同的細(xì)胞類型,需要對每個(gè)新的細(xì)胞類型進(jìn)行優(yōu)化。

● 組蛋白PTMs的非特異性抗體——事實(shí)上,絕大多數(shù)(如EpiCypher62所示,>70%)與相關(guān)標(biāo)記發(fā)生交叉反應(yīng)。

● 所有這些都將導(dǎo)致高成本和低質(zhì)量的數(shù)據(jù)!

 

這些挑戰(zhàn)共同限制了ChIP-seq數(shù)據(jù)的規(guī)模、應(yīng)用和解讀。ChIP的可靠性差,也使得它難以研究疾病的異質(zhì)性和患者的特定治療應(yīng)答。

總之,ChIP-seq無法完成表觀基因組學(xué)在精準(zhǔn)醫(yī)療方面所需的工作。那么還有什么其他選擇嗎?

 

CUT&RUN和CUT&Tag:改進(jìn)的精準(zhǔn)醫(yī)療表觀基因組學(xué)研究工具

CUT&RUN與CUT&Tag分析解決了許多與ChIP-seq相關(guān)的問題,只需取用少量細(xì)胞和測序讀數(shù)就能生成高分辨率的圖譜,并且十分快速——EpiCypher的CUTANA™ CUT&RUN與CUT&Tag分析法從細(xì)胞到測序文庫只需2到3天,而ChIP需要一周(或更長時(shí)間)。

 

CUT&RUN和CUT&Tag是研究的理想選擇,可以提高我們對疾病風(fēng)險(xiǎn)變異、基因調(diào)控程序和診斷/治療生物標(biāo)志物的認(rèn)識。與ChIP-seq相比,CUT&RUN和CUT&Tag與個(gè)性化醫(yī)學(xué)應(yīng)用相關(guān)的優(yōu)勢和特點(diǎn)包括:

 

● 高靈敏度和高通量:經(jīng)過簡化的工作流程,檢測只需要5,000個(gè)細(xì)胞

● 廣泛的細(xì)胞類型兼容性:干細(xì)胞、免疫細(xì)胞、患者衍生的異種細(xì)胞、FACS分選的細(xì)胞以及小鼠和人類原代細(xì)胞、冷凍樣品和輕度交聯(lián)的材料

● 經(jīng)驗(yàn)證的抗體,以確保您對結(jié)果的信賴

● 成本低——與ChIP-seq相比,每個(gè)反應(yīng)大約減少70%的成本。

 

CUT&RUN對大多數(shù)靶標(biāo)都很穩(wěn)健,包括瞬時(shí)相互作用蛋白(如染色質(zhì)重塑酶)、先驅(qū)因子、異染色質(zhì)靶點(diǎn),并具有單細(xì)胞兼容試驗(yàn)方案63,能分析異質(zhì)組織。重要的是,CUT&Tag只推薦用于組蛋白PTM靶點(diǎn)。

許多課題組已經(jīng)使用EpiCypher的CUT&RUN64-67和CUT&Tag68,69檢測來研究染色質(zhì)結(jié)構(gòu)并用于生物醫(yī)學(xué)研究。其他文獻(xiàn)引用已經(jīng)證明了這項(xiàng)技術(shù)在精準(zhǔn)醫(yī)療方面的前景:

 

案例研究8:神經(jīng)元中與疾病相關(guān)的增強(qiáng)子鑒定

通過結(jié)合H3K27ac CUT&RUN、ATAC-seq和RNA-seq,一組便能夠識別興奮性與抑制性人類神經(jīng)元特-有的增強(qiáng)子70。增強(qiáng)子圖譜與精神疾病風(fēng)險(xiǎn)變異數(shù)據(jù)庫相結(jié)合,顯示出與精神分裂癥、多動(dòng)癥和雙相情感障礙有關(guān)的變異富集。這項(xiàng)研究直接證明了表觀基因組學(xué)與現(xiàn)有數(shù)據(jù)集的整合可以進(jìn)一步了解疾病風(fēng)險(xiǎn)變異體的功能和異常基因的表達(dá),從而推動(dòng)精準(zhǔn)醫(yī)療。

 

案例研究9:液體活檢轉(zhuǎn)錄印跡的鑒定

CUT&RUN已被用于識別異種移植中ER+乳腺癌的轉(zhuǎn)錄印跡71。轉(zhuǎn)錄圖譜被用來對人類乳腺腫瘤進(jìn)行亞分類,而且值得注意的是,在患者的血漿中也能檢測到71。這些研究直接證明了二代CUT&RUN基因組圖譜技術(shù)在推進(jìn)新興的無創(chuàng)液體活檢個(gè)性化醫(yī)學(xué)應(yīng)用方面的潛力。

 

結(jié)論和展望

盡管精準(zhǔn)醫(yī)療面臨著定義患者特異性分子特征的困難,不可否認(rèn)它是一個(gè)令人振奮的領(lǐng)域。用于精準(zhǔn)醫(yī)療的染色質(zhì)研究有可能在兩個(gè)主要方面顯著改變該領(lǐng)域:

 

1. 新型染色質(zhì)生物標(biāo)志物的鑒定和驗(yàn)證——在現(xiàn)有的基因組和轉(zhuǎn)錄組方法的基礎(chǔ)上展現(xiàn)了一個(gè)需要監(jiān)管的、環(huán)境敏感的尚未開發(fā)領(lǐng)域。

2. 闡明驅(qū)動(dòng)疾病的轉(zhuǎn)錄調(diào)控機(jī)制——這將有助于表征疾病風(fēng)險(xiǎn)變異,并確定新的轉(zhuǎn)錄生物標(biāo)志物和藥物靶點(diǎn)。

 

CUT&RUN與CUT&Tag是能夠用于實(shí)現(xiàn)這些目標(biāo)的強(qiáng)大檢測方法。表觀基因組學(xué)在精準(zhǔn)醫(yī)療中的其他應(yīng)用包括精細(xì)繪制獨(dú)-特細(xì)胞類型中的染色質(zhì)區(qū)室,以幫助闡明疾病發(fā)展和進(jìn)展的染色質(zhì)調(diào)節(jié)機(jī)制。這種表觀基因組圖譜可與其他測序方式相結(jié)合,包括DNA甲基化、RNA-seq、ATAC-seq或Hi-C,以表征個(gè)別患者的疾病特征并改善臨床預(yù)后。

 

 

參考文獻(xiàn)(部分)

1. J?rgensen JT. Twenty Years with Personalized Medicine: Past, Present, and Future of Individualized Pharmacotherapy. Oncologist 24, e432-e40 (2019). PubMed PMID: 30940745.

2. Ashley EA. Towards precision medicine. Nat Rev Genet 17, 507-22 (2016). PubMed PMID: 27528417.

3. Ikegawa S. A short history of the genome-wide association study: where we were and where we are going. Genomics Inform 10, 220-5 (2012). PubMed PMID: 23346033.

4. Uffelmann E et al. Genome-wide association studies. Nature Reviews Methods Primers 1, 59 (2021). 

5. Wang K et al. Diverse genome-wide association studies associate the IL12/IL23 pathway with Crohn Disease. Am J Hum Genet 84, 399-405 (2009). PubMed PMID: 19249008.

6. Moschen AR et al. IL-12, IL-23 and IL-17 in IBD: immunobiology and therapeutic targeting. Nat Rev Gastroenterol Hepatol 16, 185-96 (2019). PubMed PMID: 30478416.

7. Greulich H. The genomics of lung adenocarcinoma: opportunities for targeted therapies. Genes Cancer 1, 1200-10 (2010). PubMed PMID: 21779443.

8. Targeted Therapies for Lung Cancer: American Lung Association. Available from: 

9. Boyle MP et al. A CFTR corrector (lumacaftor) and a CFTR potentiator (ivacaftor) for treatment of patients with cystic fibrosis who have a phe508del CFTR mutation: a phase 2 randomised controlled trial. Lancet Respir Med 2, 527-38 (2014). PubMed PMID: 24973281.

10. Condren ME et al. Ivacaftor: a novel gene-based therapeutic approach for cystic fibrosis. J Pediatr Pharmacol Ther 18, 8-13 (2013). PubMed PMID: 23616732.

11. Wainwright CE et al. Lumacaftor-Ivacaftor in Patients with Cystic Fibrosis Homozygous for Phe508del CFTR. N Engl J Med 373, 1783-4 (2015). PubMed PMID: 26510034.

12. Edwards SL et al. Beyond GWASs: illuminating the dark road from association to function. Am J Hum Genet 93, 779-97 (2013). PubMed PMID: 24210251.

13. Gasperini M et al. Towards a comprehensive catalogue of validated and target-linked human enhancers. Nat Rev Genet 21, 292-310 (2020). PubMed PMID: 31988385.

14. Morley M et al. Genetic analysis of genome-wide variation in human gene expression. Nature 430, 743-7 (2004). PubMed PMID: 15269782.

15. Schadt EE et al. An integrative genomics approach to infer causal associations between gene expression and disease. Nat Genet 37, 710-7 (2005). PubMed PMID: 15965475.




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